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简述gateway技术优势

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浏览:- 发布日期:2016-05-19 10:53:00【 】

gateway™技术能够克隆一个或多个基因进入到任何蛋白表达系统。这项强大的体外技术大大地简化了基因克隆和亚克隆的步骤,而同时典型的克隆效率高达95%或更高。


 该技术是基于已研究的非常清楚的λ嗜菌体位点特异重组系统(attb x attp→attl x attr)。bp和lr两个反应就构成了gateway™技术。bp反应利用一个attb dna片段或表达克隆和一个attp供体载体之间的特异位点重组,创建一个入门克隆。lr反应是一个attl入门克隆和一个attr目的载体之间的特异位点重组。


完成构建gateway™表达克隆仅需两步,为您去除冗长的亚克隆步骤(过程如图1)。

1、  创建入门克隆,通过pcr或传统的克隆方法将目的基因克隆进入门载体。

2、  混合包含目的基因的入门克隆和合适的目的载体及gateway™ lr clonase™酶,产生表达克隆。

1

gateway™利用了位点特异重组,所以在构建入门载体后,不再需要使用限制性内切酶和连接酶。一旦您拥有了一个入门载体,就可以多次使用它,转移您感兴趣的基因gateway™。改造过的的各种表达载体(如图2所示),此外,入门载体和目的载体可以通过同源重组技术相互穿梭。欧易提供的入门载体足够您使用百次以上。

2

由于在重组时dna片段的阅读框和方向保持不变,因而您不必再为新的表达克隆的担心。在使用每一种新的表达系统时,将会节省您更多的时间。好了,希望以上所讲gateway技术能为您进一步了解该技术提供些许帮助。

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