search
技术服务021-34781616

欧易生物

热门搜索关键词:转录组基因组甲基化酵母文库蛋白芯片

021-34781616

当前位置凯发k8凯发k8网址官网下载首页 » 新闻资讯 » 技术&解读&应用 » 通过dualmembrane酵母双杂交系统筛选app互作蛋白

通过dualmembrane酵母双杂交系统筛选app互作蛋白

来源: 查看手机网址
扫一扫!扫一扫!
浏览:- 发布日期:2016-11-29 09:12:16【 】

阿尔茨海默症(老年痴呆症,ad)是最常见的神经系统退行性疾病。随着人口老龄化的加重,该病越来越受到重视。然而,目前还没有能够取得根本性治疗的药物。发病机制尚不可知,其中淀粉样前体蛋白(amyloid precursorprotein; app)水解产物amyloidβ(aβ)蛋白为阿尔茨海默症发病首要原因的假说占主导地位。在细胞中app通过信号传导,参与多个生物过程,研究其信号调节作用对多种生理疾病都有重要意义。

本研究中,以app作为诱饵与cub载体相连,猎物基因与nubg载体相连构成cdna文库,通过分离泛素系统筛选互作蛋白。

实验材料:

酵母菌株:nmy51

诱饵载体:pbt3-c

cdna文库:humanbrain cdna library

实验方法:

dualmembrane酵母双杂交;免疫共沉淀

实验结果:

1.app阳性验证及筛选条件

根据实验要求,文中选择了sd-leu/trp/his/ade(7.5mm)作为app筛选条件。

2.cdna文库转化和互作子筛选

共筛选到15个阳性克隆见下图,值得注意的是,实验中在共转和筛选后发现有8个白斑在β-半乳糖苷酶检测中变蓝,说明其也与app相互作用,作为候选的app互作子后比对结果见下表。

3.在哺乳动物中stau1与app互作

通过免疫共沉淀技术验证了stau1与app在hek293t细胞中相互作用。

4.stau1降低了hek293t细胞的存活率

免疫共沉淀实验中发现当stau1转入细胞hek293t中后,细胞存活率下降,进一步研究发现结果如下表。研究说明了app和satu1均能够降低哺乳类细胞存活率,推测app可能参与rna降解来降低细胞存活。

除此以外:小编偷偷的告诉你,频繁活动手指可以预防老年痴呆症哦~~

做膜体系酵母双杂,找欧易生物~~~~

参考文献:yu y, li y, zhang y.screening of app interaction proteins by dualmembrane yeast two-hybridsystem.[j]. international journal of clinical & experimental pathology,2015, 8(3):2802-8.

推荐阅读

【本文标签】:
【责任编辑】:欧易生物凯发k8官网下载的版权所有:http://www.oebiotech.com转载请注明出处

欧易生物

技术热线:021-34781616 咨询热线:4006-4008-26

上海市闵行区新骏环路138号5幢3层
service@oebiotech.com
欧易生物
欧易生物微信公众号
 网站地图  凯发k8官网下载 copyright © 2016 凯发k8官网下载 保留所有权利