search
技术服务021-34781616

欧易生物

热门搜索关键词:转录组基因组甲基化酵母文库蛋白芯片

021-34781616

当前位置凯发k8凯发k8网址官网下载首页 » 项目文章 | 欧易客户发现调控黄瓜表皮毛萌发的新机制

项目文章 | 欧易客户发现调控黄瓜表皮毛萌发的新机制

返回列表 来源:
扫一扫!扫一扫!
浏览:- 发布日期:2018-10-25 13:36:24【 】

前言

蔬菜都注意形象了,那些聪明的脑袋羡慕不已。我们的客户也是用心良苦啊,悄悄竖起大拇指。接下来,就跟着小编很正经的看看这篇文献吧。

基本信息

今天分享的文章中,用到一个比较重要的技术是酵母双杂交(yeast two hybrid)技术。该技术是利用酵母遗传学方法分析蛋白质之间的相互作用,基于转录因子的转录激活域ad和dna结合域bd分别构建融合基因,通过激活报告基因表达,探测蛋白互作。经过完善,不但可以检测已知蛋白质之间的相互作用,还可发现与已知蛋白相互作用的未知蛋白。

csmyb6-cstry module regulates fruit trichome initiation in cucumber

期刊:journal of experimental botany 时间:2018.02 影响因子:5.83

文章通讯作者:威斯康星大学翁益群教授、中国农业大学任华中副教授

酵母双杂交文库由欧易生物完成构建

- 文章概述 -

作者是怎样一步步发现了csmyb6-cstry调控黄瓜表皮毛萌发的新机制的呢?

第一步,黄瓜中csmyb6与其他物种(金鱼草,拟南芥,棉花等)参与表皮毛萌发的蛋白序列高度保守。qpcr检测csmyb6在csgl1 mutant和wt中的表达量,表明csmyb6很大可能影响表皮毛的生成发育。作者从各个角度验证了csmyb6可以抑制表皮毛的萌发。

第二步,attry通过与 gl1竞争结合gl3/egl3,进而影响表皮毛的生成发育。因此推测cstry也影响表皮毛的生成发育。

并且,csmyb6过表达的黄瓜中cstry 的表达量很低。因此第三步,验证csmyb6与cstry之间调控关系。

- 研究背景 -

表皮毛(刺)可以帮助植物减小外力损伤、紫外线、过分蒸腾等伤害,并且其大小和多少也是衡量果实质量的一个标准。

r3myb是拟南芥中调控表皮毛生成发育的重要转录因子。而try可以抑制拟南芥表皮毛的发育。

对于黄瓜表皮毛的发育分子调控机制知之甚少。目前只发现csgl1、csgl3和csttg1三个基因。

- 研究内容 -

1.黄瓜中csmyb6与其他物种参与表皮毛生成发育同源蛋白序列比对高度保守。同时,检测csmyb6在黄瓜不同时期的各个组织器官中的表达量。嫩叶和雌雄花芽中表达最高,子房表皮细胞中表达也很高。见图一:原位杂交和gus报告基因系统验证检验结果。

图一、不同时期和部位的csmyb6的表达情况

2. csmyb6过表达对表型有什么影响呢?

图二、csmyb6过表达结果图

csmyb6过表达(ox-1,ox-2,ox-3)果实表皮毛数量明显减少了。

csgl1 mutant的表皮毛表现为发育不良短小的形态。在csgl1 mutant中过表达csmyb6,发现表皮毛数量依然会减少。

3. cstry对黄瓜有什么样的表型影响呢?

首先,cstry是黄瓜中唯一和拟南芥中的attry, atetc1 和 atcpc同源的基因。其次,cstry主要在叶片,雌雄花芽和子房中表达。最后,cstry过表达实验结果证明,cstry高表达和csmyb6一样可以减少表皮毛的数量。

图三、cstry过表达对表皮毛发育影响

4. cstry 和csmyb6之间有关系吗?

csmyb6过表达的黄瓜中检测cstry 的表达量是降低的。酵母单杂实验显示csmyb6与 cstry的启动子区域mbs1,mbs2,mbs3都有互作。emsa验证单杂结果。

图四、csmyb与cstry表达量的关系(a,b)和酵母单杂结果

5. 酵母双杂交技术验证csmyb6不同片段插入bd区域后与 插入ad区域的cstry之间互作(a和b)。cstry与csmyb6的r3 和 mixta 结构域互作。洋葱亚细胞定位显示cstry与csmyb6的表达均在细胞核和脂膜中(c)。bifc 和coip验证结果(d和e)。

图五、csmyb与cstry酵母双杂结果

- 参考文献 -

shen yang,yanling cai,et al.csmyb6-cstry module regulates fruit trichome initiation in cucumber .j exp bot, 2018-02-08.

本文系欧易生物原创

转载请注明本文转自欧易生物

推荐阅读

【本文标签】:
【责任编辑】:欧易生物凯发k8官网下载的版权所有:http://www.oebiotech.com转载请注明出处

欧易生物

技术热线:021-34781616 咨询热线:4006-4008-26

上海市闵行区新骏环路138号5幢3层
service@oebiotech.com
欧易生物
欧易生物微信公众号
 网站地图  凯发k8官网下载 copyright © 2016 凯发k8官网下载 保留所有权利